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皮質醇檢測試劑盒操作方法及原理

更新時間:2021-05-17      瀏覽次數:1650

皮質醇檢測試劑盒操作方法及原理

[背景]:皮質醇,是糖皮質激素中的一種類固醇激素。在人類中,它由腎上腺中的腎上腺皮質束狀帶產生,在壓力和低血糖時釋放,可作為壓力的一個生物標志物。皮質醇的產量與ACTH依賴的晝夜節律相關,在早晨達到峰值,隨后逐漸降低。皮質醇在很多基質中可被檢測到,如血液、糞便、尿液和唾液。血清中90-95%的皮質醇與蛋白結合,包括皮質類固醇結合球蛋白和血清白蛋白。皮質醇主要參與代謝和免疫。在代謝方面,它可促進糖異生、肝糖原沉積和降低葡萄糖利用率。在免疫方面,作為重要的抗炎因子,在過敏、免疫抑制和疾病抵抗中發揮重要作用。異常的皮質醇水平與許多狀況有關,包括前列腺癌、抑郁癥和精神分裂癥。身體組織中皮質醇過高是庫欣綜合征的誘因。
[檢測原理]:本試劑盒采用固相競爭酶聯免疫吸附檢測技術。兔抗小鼠多克隆抗體預包被在高親和力的酶標板上。皮質醇特異性的單克隆抗體加入至孔中,經過孵育,與固相抗體結合。洗滌后,加入辣根過氧化物酶標記的皮質醇和未標記的皮質醇或樣本,競爭結合單克隆抗體上有限的結合位點。在洗滌去除未結合的物質后,加入顯色底物,顏色反應的深淺與皮質醇的濃度成反比。加入終止液終止反應,在 450 nm 波長(參考波長 570 - 630 nm)測定吸光度值。                                                           樣本類型]:血清、血漿、細胞上清、組織等相關生物樣本。                                                              [規格型式]:96孔板、48孔板,可拆卸                                                                                              [保存條件]:試劑盒未拆開,2-8℃保存。已拆開,標準品-20℃保存,其它2-8℃℃保存。                   [有效期]:6個月。

敏感性/Z低檢測濃度計算方式:敏感性等于20個空白對照孔的平均O.D.值加上2個標準差后對應的濃度。樣品的O.D.讀數只有在高過敏感性指標的時候才具有統計學顯著性。                                           [變異系數]:板內變異系數<10%,板間變異系數<15%。                                                                    [回收率]:三組已知的高、中、低濃度樣品,進行五次回收率評估,回收率在85%-115%之間。
[需用戶自己提供的實驗器材和試劑]:                                                                                              1. 96孔讀板儀器。
2. 自動洗板機.
3. 移液器和槍頭。建議使用多通道移液器/排槍。
4. Eppendorf 管。

 

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